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乙酰化低密度脂蛋白制備方法與保存要求

更新時間:2024-11-11      點擊次數:412
  乙酰化低密度脂蛋白是一種經過化學修飾的低密度脂蛋白(LDL),在生物醫學研究中具有重要的應用價值。其制備與存放要求嚴格,以確保其活性和穩定性。
  乙酰化低密度脂蛋白制備方法:
  原材料準備:
  選擇健康人源血漿LDL作為起始材料,確保無Hepatitis C、HIV-I和HIV-II等病毒污染。
  使用大分子化合物(如聚乙二醇)除去LDL和高密度脂蛋白(HDL)以外的血清脂蛋白。
  金屬離子沉淀:
  采用金屬離子(如銅離子)沉淀LDL,通過調節pH值和離子強度優化沉淀條件。
  緩沖液溶解:
  使用特定緩沖液(如含有EDTA的PBS,pH 7.4)溶解沉淀,并去除未反應的金屬離子。
  乙酰化修飾:
  將LDL載脂蛋白上的賴氨酸殘基進行乙酰化修飾,阻止其與LDL受體結合,但增強其與清道夫受體的結合能力。
  無菌包裝:
  制備完成后,進行無菌過濾和分裝,確保產品無菌且可直接用于細胞培養或體內實驗。
  乙酰化低密度脂蛋白存放要求:
  溫度控制:
  低密度脂蛋白應存放在4°C的無菌環境中,避免凍存,因為凍存會導致蛋白質變性和活性喪失。
  避光保存:
  存放時應避免強光直射,以防止光敏反應導致的蛋白質降解。
  穩定性監測:
  定期檢查產品的穩定性,包括外觀、濃度和生物活性,確保其在有效期內保持良好狀態。
  使用期限:
  根據生產商提供的信息,低密度脂蛋白通常在4°C下可穩定保存數周至數月,具體期限需參考產品說明書。

 

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